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實(shí)驗(yàn)案例
首頁(yè) 實(shí)驗(yàn)案例 多樣品組織研磨儀研磨水稻葉片提取RNA實(shí)驗(yàn)|優(yōu)化提取流程
2024/5/24 9:52:14
多樣品組織研磨儀研磨水稻葉片提取RNA實(shí)驗(yàn)|優(yōu)化提取流程
來(lái)源:上海凈信

實(shí)驗(yàn)樣品:本次實(shí)驗(yàn)樣品為水稻葉片,此次選用凈信多樣品組織研磨進(jìn)行前處理操作,提取RNA實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>植物核酸提取是一個(gè)通過(guò)簡(jiǎn)易化、可操作性的手段獲取“pure” DNA和RNA的過(guò)程。植物組織越幼嫩新鮮所含的次生代謝產(chǎn)物越少,隨著植物組織的逐漸成熟,次生代謝產(chǎn)物的含量會(huì)逐漸增多。植物多糖理化性質(zhì)和核酸相似,在提取過(guò)程中容易和核酸一起沉淀,很難去除。如果去除不徹底,多糖抑制許多酶的活性,被多糖污染的核酸無(wú)法用于很多分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。植物細(xì)胞不同于動(dòng)物細(xì)胞,有著厚厚的細(xì)胞壁。傳統(tǒng)方法破碎費(fèi)時(shí)費(fèi)力,效果差,且易出現(xiàn)交叉污染。Tissuelyser系列樣本制備儀用裂解珠碰撞法(beads-beating)能夠處理各種類型植物樣本,包括根、莖、葉、種子以及藻類等;可在數(shù)秒內(nèi)徹底破碎植物細(xì)胞膜和纖維素細(xì)胞壁且無(wú)交叉污染、核酸蛋白易降解等問(wèn)題。

實(shí)驗(yàn)設(shè)備:

多樣品組織研磨儀 Tissuelyser-192L

實(shí)驗(yàn)步驟:

1、準(zhǔn)備多樣品組織研磨儀-192L一臺(tái),96深孔板2塊,5mm研磨珠。

2、96深孔本以及適配器放入液氮冷凍。

3、將深孔板放入儀器內(nèi),旋緊螺帽。

4、按運(yùn)行鍵啟動(dòng),進(jìn)行樣品研磨。

5、研磨結(jié)束,關(guān)閉電源,將研磨罐從研磨倉(cāng)取出,用開(kāi)蓋工具打開(kāi)蓋子,取出樣品即可。

實(shí)驗(yàn)對(duì)比圖:

樣本研磨前后效果圖

注意事項(xiàng):

1、按照樣品量來(lái)選擇研磨珠配比和參數(shù)設(shè)置,能達(dá)到最好的效果,有不清楚的及時(shí)問(wèn)上海凈信銷售人員。

2、往適配器里放研磨管時(shí)注意平面配平,保證適配器壓蓋在水平線。

本次實(shí)驗(yàn)通過(guò)使用多樣品組織研磨儀Tissuelyser-192L對(duì)水稻葉片進(jìn)行研磨,并成功提取了RNA。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,我們深刻體會(huì)到了研磨儀在植物組織研磨和RNA提取方面的顯著優(yōu)勢(shì)。裂解珠碰撞法不僅能夠在短時(shí)間內(nèi)徹底破碎植物細(xì)胞壁,還避免了傳統(tǒng)方法中的費(fèi)時(shí)費(fèi)力、效果差以及交叉污染等問(wèn)題。通過(guò)本次實(shí)驗(yàn),我們驗(yàn)證了該研磨儀在處理植物樣本、尤其是水稻葉片方面的有效性,并成功獲得了高質(zhì)量的RNA樣本。這為后續(xù)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)提供了有力的支持。同時(shí),我們也意識(shí)到在實(shí)驗(yàn)中合理設(shè)置研磨珠配比和參數(shù)的重要性,以及實(shí)驗(yàn)操作中的注意事項(xiàng),這將有助于我們更好地進(jìn)行類似實(shí)驗(yàn),提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

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