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2024/5/24 9:52:14

多樣品組織研磨儀研磨水稻葉片提取RNA實驗|優(yōu)化提取流程

來源:上海凈信

實驗樣品:本次實驗樣品為水稻葉片,此次選用凈信多樣品組織研磨進行前處理操作,提取RNA實驗。

實驗?zāi)康模?/span>植物核酸提取是一個通過簡易化、可操作性的手段獲取“pure” DNA和RNA的過程。植物組織越幼嫩新鮮所含的次生代謝產(chǎn)物越少,隨著植物組織的逐漸成熟,次生代謝產(chǎn)物的含量會逐漸增多。植物多糖理化性質(zhì)和核酸相似,在提取過程中容易和核酸一起沉淀,很難去除。如果去除不徹底,多糖抑制許多酶的活性,被多糖污染的核酸無法用于很多分子生物學(xué)實驗。植物細胞不同于動物細胞,有著厚厚的細胞壁。傳統(tǒng)方法破碎費時費力,效果差,且易出現(xiàn)交叉污染。Tissuelyser系列樣本制備儀用裂解珠碰撞法(beads-beating)能夠處理各種類型植物樣本,包括根、莖、葉、種子以及藻類等;可在數(shù)秒內(nèi)徹底破碎植物細胞膜和纖維素細胞壁且無交叉污染、核酸蛋白易降解等問題。

實驗設(shè)備:

多樣品組織研磨儀 Tissuelyser-192L

實驗步驟:

1、準備多樣品組織研磨儀-192L一臺,96深孔板2塊,5mm研磨珠。

2、96深孔本以及適配器放入液氮冷凍。

3、將深孔板放入儀器內(nèi),旋緊螺帽。

4、按運行鍵啟動,進行樣品研磨。

5、研磨結(jié)束,關(guān)閉電源,將研磨罐從研磨倉取出,用開蓋工具打開蓋子,取出樣品即可。

實驗對比圖:

樣本研磨前后效果圖

注意事項:

1、按照樣品量來選擇研磨珠配比和參數(shù)設(shè)置,能達到最好的效果,有不清楚的及時問上海凈信銷售人員。

2、往適配器里放研磨管時注意平面配平,保證適配器壓蓋在水平線。

本次實驗通過使用多樣品組織研磨儀Tissuelyser-192L對水稻葉片進行研磨,并成功提取了RNA。實驗過程中,我們深刻體會到了研磨儀在植物組織研磨和RNA提取方面的顯著優(yōu)勢。裂解珠碰撞法不僅能夠在短時間內(nèi)徹底破碎植物細胞壁,還避免了傳統(tǒng)方法中的費時費力、效果差以及交叉污染等問題。通過本次實驗,我們驗證了該研磨儀在處理植物樣本、尤其是水稻葉片方面的有效性,并成功獲得了高質(zhì)量的RNA樣本。這為后續(xù)的分子生物學(xué)實驗提供了有力的支持。同時,我們也意識到在實驗中合理設(shè)置研磨珠配比和參數(shù)的重要性,以及實驗操作中的注意事項,這將有助于我們更好地進行類似實驗,提高實驗結(jié)果的準確性和可靠性。

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